· poliakrilamidjèl la dwe fèt ak monomè akrilamid, materyèl depa polimerizasyon, katalis, ak melanj sèl ak tanpon an ansanm.
· akrilamidepi BIS (N, N'- metilèn doub akrilamid) se matris jèl fòm monomè a.
· Pèrsulfat amonyòm kòmanse pwosesis polimerizasyon adezif la. Fòmilasyon lakòl la mande yon solisyon pèrsulfat amonyòm 10% prepare nan dlo. Pifò enfòmasyon yo endike yon nesesite pou itilizasyon aktif. Sepandan, solisyon 10% la ka mete nan 4℃ pandan plizyè semèn san yon pèt aktivite siyifikatif. Ajoute jiska 10 ml epi jete lè lakòl la pa rasanble.
Konsèy: Pousantaj laakrilamidNan sekans lakòl ak lakòl pwoteyin pa menm bagay la. Si w ap itilize solisyon akrilamid: BIS ki deja fèt, asire w ou jwenn bon boutèy la.
· TEMED (N, N, N', N'- tetrametil etilendiamin) se yon katalis, nan yon boutèy mawon, yo mete l nan frijidè a. Ajoute l jis anvan ou vide lakòl la.
· Vè poliakrilamid ki itilize nan elektwoforèz la ta dwe lave anvan ak apre chak fwa. Apre elektwoforèz la, lave l avèk yon bwòs mou ak yon twal nan dlo cho savon, rense l avèk dlo distile epi kite l seche.
· Imidite ak pousyè ka koze pa polymère kre. Anvan elektwoforèz, netwaye plak an vè a ak yon pwodui netwayaj pou vit epi siye l ak yon bwòs mou. Lave l ak dlo distile epi seche l byen ak yon ti sèvyèt papye. Rense l ak 70% etanòl anvan ou siye l ak papye ede netwaye epi akselere siye a. Ajoute echantiyon akrilamid yo youn apre lòt: BIS, dlo, solisyon tanpon, pèrsulfat amonyòm, TEMED. Souke byen epi vide imedyatman.
Li pa nesesè pou degaze poliakrilamid la anvan polimerizasyon an. (Yo te konn mete akrilamid nan yon vakyòm pou retire bul yo paske oksijèn anpeche polimerizasyon an.)
Echantiyon pwent lakòl orizontal.
· Mete yon moso papye nwa nan bwat ki anba a, ak yon fon nwa pou fè yon twou pou echantiyon an epi pou ou ka wè pi klè.
· tank lakòl plen ak yon tampon, jis anlè koloid la.
· Si gen limyè sou kwen an, limen limyè yo, kite limyè koloid la klere. Mete echantiyon an nan pipèt la.
· lè l sèvi avèk yon aparèy pipètaj otomatik.
· Nan 10-200 mu, 1 pwen likid ka deplase nan pifò pwen yo sou echantiyon an. Pou twou echantiyon ki piti anpil (mwens pase 10μ1), tèt pipèt long ki itilize pou sekans lakòl la pi pratik.
· pipète a jis plonje nan echantiyon an, respire likid k ap deplase dousman. Echantiyon an ka parèt kolan ak gliserin, epi ponpe rapidman ka rale ti boul lè nan tèt pipèt la.
· Apre ou fin respire echantiyon yo ak tèt pipète a, li pral deplase tèt likid la dousman sou kwen tiyo a oubyen siye papye a pou aspire tèt likid la deyò ti gout yo. Fè atansyon pou ou pa aspire echantiyon an.
Mete echantiyon an nan twou echantiyon an
· Aparèy pipètaj pou kenbe yon ti presyon, fè echantiyon yo deplase yon ti kras lè tèt likid ki debòde a.
· tèt pipèt la mete nan tampon an, yon ti kras pi wo pase twou yo, kenbe yon presyon pozitif. Ou ka mete pwent pipèt la nan yon ti twou.
· Dousman e piti piti, retire echantiyon yo. Mete pwent pipèt la anlè twou echantiyon an, epi echantiyon an ap antre nan twou a. Kite echantiyon an antre pou l ranpli twou echantiyon an olye pou l pouse l anndan.
· Yon fwa dènye gout echantiyon an rive ak tèt likid la, likid la ap deplase nan dezyèm janm nan, leve likid la dousman, deplase soti nan tanpon an
Kijan pou fè echantiyonaj lakòl vètikal?
· twou echantiyon pwen lakòl vètikal ki fòme ant de moso vè. Nan lakòl ki trè mens, tèt pipèt la pa menm ka mete ant de plak vè. Atansyon gliserin nan! Mete tèt pipèt la sou twou echantiyon an epi echantiyon an ap koule nan twou a.
· Anvan ou pran echantiyon an, asire w ou mete pwent vètikal la nan twou echantiyon an ki fèt ak jèl polipropilèn asil la byen rense. Lave akrilamid ki pa polimerize a ansanm ak dlo ki ka parèt nan fon twou echantiyon an. Dlo a ka fè twou echantiyon an pi piti anpil. Sèvi ak yon sereng 25ml oswa 50ml ak yon zegwi kalib 18. Vide tanpon elektwoforèz la epi rense twou echantiyon an ak anpil atansyon.
· Li ka difisil pou wè twou echantiyon an, men an menm tan, rès la fasil. Si gen twòp twou, yo ka teste tanpon echantiyon an ak ble bromofenol.
Dat piblikasyon: 31 mas 2023