· poliakrilamidjèl dwe pa monomère acrylamide, polymérisation kòmanse materyèl, katalis, ak dwa sèl ak melanj tanpon ansanm.
· akrilamidak BIS (N, N '- methylene doub akrilamid) se matris jèl fòm monomè.
· amonyòm persulfate kòmanse pwosesis adezif polymérisation.Fòmilasyon lakòl la mande pou 10% solisyon persulfate amonyòm prepare nan dlo.Pifò nan enfòmasyon yo endike yon bezwen pou itilizasyon aktif.Sepandan, solisyon an 10% ka mete nan 4 ℃ pou plizyè semèn san pèt enpòtan nan aktivite.Fè jiska 10 ml epi jete lè lakòl la echwe nan total.
Ide: Pousantaj nanakrilamidnan sekans lakòl ak lakòl pwoteyin se pa menm bagay la.Si w ap itilize acrylamide premade: solisyon BIS, asire w ke w jwenn bon boutèy la.
· TEMED (N, N, N ', N '- tetramethyl ethylenediamine) se yon katalis, nan yon boutèy mawon, mete nan frijidè a.Ajoute jis anvan vide lakòl.
· Polyacrylamid elektwoforèz itilize vè nan elektwoforèz yo ta dwe lave anvan ak apre chak fwa.Apre elektwoforèz, lave ak yon bwòs mou ak twal nan dlo cho savon, rense l avèk dlo distile epi kanpe pou sèk.
· imidite ak pousyè ka lakòz ak polymère kre.Anvan elektwoforèz, netwaye plak an vè ak netwayaj vè epi siye li ak yon bwòs mou.Lave ak dlo distile epi sèk byen avèk yon ti sèvyèt papye.Rense ak 70% etanòl anvan siye ak papye ede netwaye ak pi vit siye.Ajoute echantiyon akrilamid youn apre lòt: BIS, dlo, solisyon tanpon, persulfate amonyòm, TEMED.Souke byen epi vide imedyatman.
Li pa nesesè pou degaze poliakrilamid anvan polimerizasyon.(Akrilamid te itilize pou mete nan yon vakyòm pou retire bul paske oksijèn anpeche polimerizasyon.)
Orizontal lakòl pwen echantiyon konsèy.
· mete yon moso papye nwa nan bwat anba a, nwa background pou fè kèk twou echantiyon yo wè pi klè.
· tank lakòl plen tanpon, jis sou koloyid la.
· si kwen an gen yon limyè, limen limyè yo, kite limyè klere koloid.Trase echantiyon an nan pipèt la.
· lè l sèvi avèk aparèy pipet otomatik.
· nan 10-200 mu 1 likid k ap deplase pwen ka itilize nan pi fò nan pwen yo sou echantiyon an.Pou twou echantiyon piti anpil (mwens pase 10μ1), tèt la pipèt long yo itilize pou sekans lakòl pi pratik.
· Pipèt jis benyen nan echantiyon an, respire dousman likid k ap deplase.Echantiyon an ka parèt kolan ak gliserin, ak ponpe rapid ka trase bul lè nan tèt la pipèt.
· echantiyon apre yo fin respire tèt pipette, yo pral deplase tèt likid dousman sou kwen nan tiyo a oswa siye papye souse tèt likid deyò nan ti gout yo.Fè atansyon pou pa souse echantiyon an.
Mete echantiyon an nan twou echantiyon an
· Pipèt aparèy pou kenbe yon ti presyon, fè echantiyon yo yon ti kras deplase tèt likid debòde.
· tèt la pipet mete nan tanpon an, yon ti kras pi wo pase twou yo tach, kenbe presyon pozitif.Ka pwent nan pipèt la dwe mete nan yon ti twou.
· dousman ak piti piti echantiyon yo soti.Pwent pipèt la mete anlè twou echantiyon an, epi echantiyon an pral koule nan twou a.Kite echantiyon an koule pou ranpli twou echantiyon an olye pou yo pouse nan.
· yon fwa dènye gout echantiyon an ak tèt likid, likid ap deplase nan dezyèm janm la, tou dousman ogmante mouvman likid la, deplase soti nan tanpon.
Ki jan fè echantiyon vètikal lakòl?
· vètikal lakòl pwen echantiyon twou ki te fòme ant de moso vè.Nan lakòl trè mens, tèt la pipèt pa menm ka mete ant de plak vè.Gade gliserin la!Mete tèt la pipèt sou twou echantiyon an epi echantiyon an pral koule nan twou a.
· echantiyon pwen anvan, asire w ke ou mete pwen vètikal nan twou echantiyon polypropylène acil jèl se rense pwòp.Lave akrilamid ki pa polimerize a ak dlo ki ka parèt anba twou echantiyon an.Dlo a ka fè twou echantiyon an siyifikativman pi piti.Sèvi ak yon sereng 25ml oswa 50ml ak yon zegwi kalib 18.Vide tanpon elektwoforèz la epi ak anpil atansyon lave twou echantiyon an.
· li ka difisil pou wè twou echantiyon an, men an menm tan an, rès la fasil.Si gen twou depase, tanpon echantiyon an ka teste ak bromophenol ble.
Lè poste: Mar-31-2023